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這篇文章將為大家詳細講解有關circinteractome數據庫有什么用,小編覺得挺實用的,因此分享給大家做個參考,希望大家閱讀完這篇文章后可以有所收獲。
RNA binding protein, 簡稱RBP,稱之為RNA結合蛋白,是一類調控RNA代謝過程的蛋白質,主要作用是介導RNA的成熟,轉運,定位和翻譯等過程;miRNA是一類長度在21bp左右的小RNA,可以結合到靶標RNA上,抑制其翻譯或者使其降解,發揮一個轉錄后調控作用,這兩種物質都具有非常重要的RNA調控作用。
隨著高通量測序和生物信息的發展,識別到的環狀RNA數量在不斷增加,但是大部分環狀RNA的生物學功能仍然是未知的。為了探究環狀RNA的功能,有學者整理了環狀RNA與RBP,miRNA之間的調控信息,構建了circinteractome數據庫,網址如下
https://circinteractome.nia.nih.gov/index.html
數據庫構建的流程示意如下
從circbase獲取環狀RNA基因組位置信息,通過UCSC提取環狀RNA的序列,利用環狀RNA頭尾相連構成的junction reads,查詢CLIP等數據分析結果,得到環狀RNA與RBP蛋白的結合信息,設計驗證環狀RNA的PCR引物,查詢siRNA位點;利用環狀RNA全長序列,查詢RBP結合位點,miRNA結合位點,以及IRES位點。
通過該數據庫,可以實現以下功能
查詢環狀RNA的基本信息,包括環狀RNA ID,染色體位置,來源基因,RBP結合等信息,結果示意如下
查詢環狀RNA上的RNA蛋白結合位點,結果示意如下
查詢環狀RNA上的miRNA結合位點,通過targetscan軟件來預測,結果示意如下
通過PCR擴增環狀RNA序列時,PCR引物的方向和常規線性RNA的是不同的,圖示如下
在實際操作中,從環狀RNA連接點兩側各取50到100bp的序列來設計PCR引物,數據庫中給出的結果如下所示
siRNA稱之為小干擾RNA,是一種長度在20-25bp范圍內的雙鏈RNA,作用和miRNA類似,可以與靶標RNA結合,具有調控基因表達的功能。通過該數據庫可以查詢環狀RNA可能的siRNA結合序列,從而幫助我們設計siRNA,結果示意如下
該數據庫不僅提供了環狀RNA與RBP,miRNA的調控網絡,還可以幫助我們設計PCR引物來驗證環狀RNA,或者設計siRNA干擾環狀RNA的表達
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